1) suposição segura. Suas treliças de piso estão carregando a carga de toda a sala. Um pouco mais de peso não vai importar.
2) Você quer uma superfície relativamente nivelada, mas o próprio tinset terá flexibilidade suficiente para permitir que seu piso final seja perfeitamente nivelado, desde que você reserve algum tempo para garantir que cada peça seja colocada no mesmo nível. Se sua variação for maior que 1/8 ", será necessário aplicar mais / menos thinset com base na altura relativa (subpiso inferior - mais thinset) para garantir que você possa ficar nivelado. Se você quiser remover todas as dúvidas, camada fina de concreto autonivelante derramando primeiro (sele todos os buracos !!!) lhe dará aquela superfície nivelada que você quer.
3) Eu pessoalmente não colocaria nenhuma lacuna entre o subflooring enquanto o material fosse o mesmo. No entanto, o thinset preencherá suas lacunas - e você não quer preencher as lacunas ao redor da parede externa, porque elas servem a um propósito de expansão.
Uma outra nota - este é um chão do banheiro, certo? Por favor, aplique a impermeabilização no chão antes de prosseguir. A água vai penetrar na argamassa (a menos que seja epóxi) e ficar presa, e se você não for à prova d'água, a madeira irá apodrecer.
Além disso - relacionado ao meu comentário acima - você não precisa precisar para usar o backerboard. Backerboard é para a telha montada na parede, a ser usada em vez do drywall (não apodrece). No entanto, como indicado nos comentários abaixo, usá-lo é bom e pode de fato ser recomendado, pois é uma superfície melhor para proteção da água do que a madeira quando sob um piso.