Você não precisa preparar uma ação para fazer um ataque de oportunidade

O Manual do Jogador tem esta seção sobre Ataques de oportunidade (ênfase minha):

Opportunity Attacks

You can make an opportunity attack when a hostile creature that you can see moves out of your reach. To make the opportunity attack, you use your reaction to make one melee attack against the provoking creature. The attack occurs right before the creature leaves your reach.

As únicas coisas de que você precisa são sua reação e, para a criatura hostil que você pode ver sair do seu alcance, não há necessidade de preparar uma ação.

Para maior clareza, aqui está o texto em Preparando uma ação (ênfase minha):

Ready

Sometimes you want to get the jump on a foe or wait for a particular circumstance before you act. To do so, you can take the Ready action on your turn, which lets you act using your reaction before the start of your next turn.

First, you decide what perceivable circumstance will trigger your reaction. Then, you choose the action you will take in response to that trigger, or you choose to move up to your speed in response to it. Examples include "If the cultist steps on the trapdoor, I'll pull the lever that opens it," and "If the goblin steps next to me, I move away."

When the trigger occurs, you can either take your reaction right after the trigger finishes or ignore the trigger.

Teoricamente, você poderia executar a ação Pronto para preparar um ataque para desencadear quando um oponente sair do seu alcance (basicamente uma imitação exata do Ataque da Oportunidade), mas não há necessidade de fazer isso, pois você sempre tem a capacidade de realizar um Ataque da Oportunidade (desde que você tenha sua reação e nada mais o impeça, como o oponente que usa a ação Desativar). Sinta-se livre para usar sua ação no que mais você quiser.

Você pode até optar por preparar uma ação diferente e, em seguida, escolher entre sua ação pronta e fazer um ataque de oportunidade (por a esta pergunta)! Porém, lembre-se de que você ainda tem apenas a reação 1 por rodada (exceto exceções específicas, como o Cavalier Fighter).

Não

Por rodada, cada criatura em combate pode realizar uma Ação, uma possível Ação Bônus (essas duas no seu turno) e uma Reação. (Você pode usar a reação a qualquer momento em resposta a um gatilho especificado pelo tipo de reação tomada e recuperar o uso da reação no início do seu turno.)

Para fazer um ataque de oportunidade, você precisa de uma criatura que possa ver para deixar seu alcance e ter sua reação disponível.

You can make an opportunity attack when a hostile creature that you can see moves out of your reach. To make the opportunity attack, you use your reaction to make one melee attack against the provoking creature. The attack interrupts the provoking creature's movement, occurring right before the creature leaves your reach.

--- Player's Handbook, p. 195

A ação Pronto é para executar uma ação (como a ação Ataque) em resposta a algum gatilho definido. Esse gatilho pode ser uma criatura deixando seu alcance, mas também quando uma criatura entra em seu alcance, a lua explode ou seu Feiticeiro fica rosa brilhante.

Sometimes you want to get the jump on a foe or wait for a particular circumstance before you act. To do so, you can take the Ready action on your turn so that you can act later in the round using your reaction.

First, you decide what perceivable circumstance will trigger your reaction. Then, you choose the action you will take in response to that trigger, or you choose to move up to your speed in response to it.

--- Player's Handbook, p. 193